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    ELISA樣本處理時(shí)的注意事項(xiàng)
    Article Source:江蘇酶標(biāo)生物科技有限公司   add time:2020/4/9 17:36:30 CTR:1645

    ◆ 每個(gè)標(biāo)本量收集體積=100ul×檢測(cè)種類(lèi),如要做復(fù)孔,標(biāo)本量收集體積= 100ul× 檢測(cè)種類(lèi)×2 。

    ◆ 對(duì)于作某一個(gè)具體指標(biāo)來(lái)說(shuō),最好先用一系列稀釋度作一批標(biāo)本測(cè)定,得出對(duì)實(shí)驗(yàn)有意義的一個(gè)稀釋度(即測(cè)定劑量反應(yīng)曲線(xiàn)),然后用一個(gè)最適稀釋度測(cè)定即可。

    ◆ 收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。

    ◆ 對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在 4 ℃ 備用,如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。

    ◆ 避免反復(fù)凍融。標(biāo)本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時(shí), -20 ℃ 可保存 1 個(gè)月。 -70 度可保存 6 個(gè)月。部分激素類(lèi)標(biāo)本需添加抑肽酶。

    ◆ 血清標(biāo)本采集時(shí),應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以 HRP 為標(biāo)記的 ELISA 測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。

    ◆ 為了保證尿液檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,必須正確收集尿液標(biāo)本和保存。

    盛尿容器要清潔干燥。 最好使用一次性的容器(如塑料尿杯),避免因用藥并清洗不干凈而造成的污染,影響檢測(cè)結(jié)果。

    尿液標(biāo)本必須新鮮,留取后,應(yīng)及時(shí)檢測(cè)或保存,以免細(xì)菌繁殖。因在室溫中久置后(尤其是夏季)尿中磷酸鹽等可析出結(jié)晶而干擾檢測(cè)。

    ◆ 標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。

    如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性 HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。保存過(guò)久可發(fā)生聚合在 ELISA 中可使本底加深。

    ◆ 凍結(jié)標(biāo)本融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。

    ◆ 混濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。

    ◆ 反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低,所以待測(cè)標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。也可加入適當(dāng)防腐劑。

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