ELISA試劑盒實驗稀釋血清的步驟:
先把蛋白稀釋一定的倍數(shù),比如說10倍、20倍稀釋(這樣可以大體確定一個參數(shù)),將抗原進行一系列稀釋包被微量反應板,再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進行孵育后洗滌,再加酶結(jié)合物進行反應,經(jīng)孵育洗滌后,加底物溶液顯色,終止反應后分別測定OD值,選擇OD值≥1.0的那個抗原稀釋度為最適包被濃度。
一般總是要選擇那個OD值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清OD值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的OD值有明顯差別。
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