近日，客戶介紹自己在洗板操作過程遇到棘手問題，麻煩我司技術給她提供解決處理方法及建議。主要問題如下：
問題一：說明書上說洗板時要把孔里的水甩干，可我做的時候，無論我怎么拍，孔底還是有殘留液體，請問這對試驗有沒有影響？或著有沒有別的什么好的辦法可以解決這個問題？
答：有一定的影響.尤其二抗反應后洗滌不好，會出現非特異.ELISA試驗中洗滌是關鍵.盡可能甩干，而且盡量少拍，不一定每次都很干，但是后一次洗滌要盡量干。洗滌中另一個值得注意的是盡量不要出氣泡。如果有條件的話，可用洗板機。
問題二：什么才叫封閉好了呢？有沒有什么標準？
答：一般用1%BSA，150μl，37度，2h，如果還有非特異反應的話，可能有其他原因，比如加樣時濺到了壁上或有氣泡，洗滌不充分，二抗濃度過高，封閉物不合適以及反應條件是否得當等。
問題三：1%bsa,你是用什么稀釋的，我用過pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀釋，結果封閉的效果都不怎么明顯，與不封閉差不多。
答：1%BSA用PBS稀釋就可以了。還有就是要注意你的操作，背景高不一定是封閉的問題。
ELISA試劑盒洗板方法有以下兩點
一、手工洗板方法
吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘，根據需要，重復此過程數次。
二、自動洗板
如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。待檢樣本：體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等。
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