伊人久久综合,国产小视频国产精品,一级在线黄片,久久精品视频16,综合欧美日韩一区二区三区,色多多成人黄app在线观看

你好!歡迎訪問江蘇酶標生物科技有限公司Jiangsu Meibiao Biotechnology Co., Ltd網站!
全國服務熱線:0515-63663390
詳細內容
當前位置:>詳細內容>>回到首頁
    ELISA檢測樣本類型的多種化
    Article Source:江蘇酶標生物科技有限公司   add time:2020/7/8 14:07:07 CTR:1726

    一般咱們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細胞培養上清或安排勻漿液等,不同類型的檢測樣本前期的處理辦法是不一樣的。正確的處理樣本是確保ELISA檢測的正確性和準確性的關鍵,下面簡略介紹一下不同類型的樣本的處理辦法。

    1、血清

    血清是最常用于ELISA檢測的一類樣本,處理也比較簡略。用無熱原、無內毒素的試管或離心管搜集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃一個晚上,使血清分出。(最好將試管或離心管歪斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的分出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細搜集上清。主張將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,防止重復凍融。采血過程中應防止溶血,由于紅細胞裂解時會開釋具有過氧化酶活性的物質,在以HRP為標記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色,而導致檢測的不準確性。一起也應防止細菌污染,由于菌體內可能含有內源性的HRP然后導致檢測的假陽性。

    2、血漿

    用含抗凝劑的采血管或離心管搜集血液標本,標本搜集后30min內4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,防止重復凍融。防止運用溶血或高血脂的標本。常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等,檢測時還應仔細閱讀試劑盒說明書,檢查試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。

    3、細胞培養上清

    取細胞培養上清到離心管,1000×g離心20min,除掉細胞碎片及雜質,取上清,-20℃或-80℃保存,防止重復凍融。

    4、細胞裂解液

    1)吸去培養板內的培養基,用胰酶消化細胞,加適量培養基將細胞從培養板上吹下來。懸浮細胞可省掉。

    2)搜集細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養基,用預冷的PBS潤洗3次。

    3)參加適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前參加蛋白酶按捺劑)重懸細胞。一般6孔板一個孔的細胞量需求150~250μL PBS重懸。

    4)將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫凍結樣品,重復凍融幾回,使細胞充沛裂解。也可將樣品進行超聲破碎,以到達裂解的意圖。

    5)4℃ 10000×g 離心10min,除掉細胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,防止重復凍融。

    5、安排勻漿液

    1)將安排樣本用PBS (0.01錨點錨點M, PH 7.4) 沖刷,洗去安排表面殘留的血液或雜質。

    2)將安排塊稱重,記錄后剪碎,碎塊應盡量小,便于勻漿得更充沛

    3)將安排按必定的份額參加預冷的PBS(臨用前參加蛋白酶按捺劑)勻漿,勻漿時置于冰上或冰浴中。(一般按安排分量:PBS體積=1:9的份額勻漿,例如1g的安排樣本對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需求恰當調整,檢測后核算樣品濃度時應乘以相應的稀釋倍數)

    4)汲取勻漿液到離心管,4℃ 5000×g 離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,防止重復凍融。

    6、尿液、唾液等其他液體生物樣本

    1000×g離心20min,取上清即可檢測。

    總的來說,由于ELISA只能檢測可溶性蛋白的含量,所以應確保一切樣本均為弄清的液體,沉積或懸浮物都應離心去除。

    為了確保檢測的準確性,保存于-20℃或-80℃的樣本最好在1~6個月內檢測;4℃保存的樣本應在1周內進行檢測。別的,還應確保樣本不含NaN3,由于NaN3會按捺HRP的活性,然后導致假陰性的成果。

    上一條新聞:顯色和比色在ELISA試劑盒實驗中的影響      下一條新聞:選擇合適的ELISA試劑盒需要考慮哪些參數      

客戶服務熱線

0515-63663390

在線客服