當ELISA實驗中的樣本值較低挨近試劑盒的靈敏度時，就容易發生樣本值低于空白值的現象，特別是在血清和血漿樣本的查看。
基質效應分析中，基質指的是樣本中被分析物以外的組分，基質常常對分析物的分析進程有顯著的煩擾，并影響分析成果的準確性，這些影響和煩擾被稱為基質效應。
仿照物與被測樣本在蛋白豐度、復雜性、pH等要素都會存在差異。當單個樣本或少量樣本值低于空白值時，可能是過錯要素，這時應增加重復，進步操作技術。當許多樣本都低于空白值時，應思考基質效應的影響，建立校正曲線予以修改。
ELISA試劑盒在開發進程中，標準品不能選用人或動物血清、血漿作為標準曲線的稀釋液，只能選用其仿照物。當樣本的基質與其仿照物對比，下降抗原抗體的聯絡，便產生了樣本值低于空白值的現象。構成樣本值無法計算出數值，或許數值為負。
如今最常用的去掉基質效應的方法是，經過已知分析物濃度的標準樣品，一同盡可能堅持樣本中的基質不變，建立一個校正曲線。
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