對(duì)于ELISA實(shí)驗(yàn)新手們來(lái)說(shuō)，一場(chǎng)實(shí)驗(yàn)下來(lái)還是有一定難度的，主要是因?yàn)檫�沒(méi)有掌握一些實(shí)驗(yàn)中的小技巧，掌握了實(shí)驗(yàn)技巧之后，做ELISA實(shí)驗(yàn)會(huì)容易很多。今天就為大家分享ELISA實(shí)驗(yàn)的入門小技巧，一起來(lái)看看吧！
1、加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
2、合理安排檢測(cè)量，以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
3、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
4、要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，又能反映出試劑盒的精密度。
5、樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。
6、為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
7、未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請(qǐng)于2-8℃保存。辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。
8、ELISA實(shí)驗(yàn)中，加樣后及時(shí)放入孵箱，標(biāo)本較多時(shí)，要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗徹底。
9、剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
10、每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是后加底物溶液及2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
11、手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15～30s，不要將一個(gè)酶標(biāo)孔中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
12、沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí)，可以使用純凈水配制溶液，切勿使用自來(lái)水。
13、在使用微量加樣器時(shí)，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭。
14、吸取液體時(shí)速度不易太快，以免產(chǎn)生氣泡。
以上就是ELISA實(shí)驗(yàn)的一些入門小技巧，掌握了這些小技巧，做ELISA實(shí)驗(yàn)就會(huì)容易很多。
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