ELISA實驗是一種靈敏度高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法,ELISA實驗中有很多因素影響著實驗結果,導致出現“花板”問題。為了避免“花板”問題的出現,降低檢測的假陽性率,獲得更理想的實驗結果,首先我們在選擇ELISA試劑時,應選擇靈敏度高、特異性好、穩定性好、批間差小、價格操作方便、省時的試劑。并在檢驗的過程中應采取下列措施:
(1)檢測之前,加大離心轉速,盡量延長時間,使血細胞和纖維蛋白充分沉淀,讓血細胞與血清徹底分離。
(2)抽取樣本時應抽出足夠檢驗量的血液標本,選擇無添加劑的真空試管。(3)血液標本應置于室溫下1~2h,使血液凝固收縮,然后離心檢測或讓
血液過夜后再檢測。這樣才能使得血液充分收縮,讓標本中的非特異性物質所致的假陽性率降至最低。
(4)加樣時不能加入紅細胞或纖維蛋白,要按照操作說明書去做,否則會影響實驗結果。
(5)封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發,產生周邊現象從而導致“花板”的出現。
(6)手工洗板時應注意液體被濺出或孔與孔之間的液體溢出,連成整體液面后產生“花板”。
(7)洗液的溫度也會影響洗板的干凈程度,尤其是冬天溫度過低時容易出現“花板”問題。
(8)用洗板機洗板時應防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象而導致“花板”的出現。
以上就是避免“花板”出現的措施,大家在實驗過程中一定要多加注意。
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